Pem­bu­atan Se­di­aan Da­rah Tepi (Te­bal Dan Apus)

Ting­kat Ke­te­ram­pilan: 4A

Tu­juan

a. Me­nye­di­a­kan slide un­tuk di­per­iksa se­cara mik­ro­sko­pik.

b. Se­di­aan da­rah apus	da­pat	di­gu­na­kan un­tuk pe­me­rik­saan
mor­fo­logi sel da­rah.
c. Se­di­aan da­rah te­bal	da­pat	di­gu­na­kan un­tuk pe­me­rik­saan
pa­ra­sit fi­la­ria.

d. Se­di­aan da­rah te­bal dan apus da­pat di­gu­na­kan un­tuk pe­me­rik­saan mik­ro­sko­pik ma­la­ria. Wa­lau­pun pe­me­rik­saan mik­ro­sko­pik ma­la­ria bu­kan me­ru­pa­kan kom­pe­tensi dok­ter umum, na­mun dok­ter perlu mampu mem­buat se­di­aan yang

baik agar da­pat di­ki­rim dan di­per­iksa de­ngan baik oleh te­naga ahli se­cara mik­ro­sko­pik.

Alat dan Ba­han

a. Sa­rung ta­ngan se­ba­gai alat per­lin­dungan diri

b. Ka­pas al­ko­hol

c. Ka­pas ke­ring

d. Lan­set se­kali pa­kai

e. Kaca ob­yek

f. Me­ta­nol

g. La­rutan Gi­emsa

h. La­rutan bu­f­fer (da­pat di­ganti de­ngan air su­ling atau des­til­led wa­ter bila ti­dak ter­se­dia)

i. Rak pe­nge­ring

j. Ker­tas tisu atau ker­tas sa­ring

Pro­se­dur

a. Pem­bu­atan se­di­aan da­rah te­bal

1. Per­si­ap­kan ujung jari pa­sien yang akan di­tu­suk. La­ku­kan des­in­feksi de­ngan meng­gu­na­kan ka­pas al­ko­hol.

2. Tu­suk ujung jari pa­sien de­ngan meng­gu­na­kan lan­set se­kali pa­kai.

3. Ha­pus te­tesan da­rah yang per­tama ke­luar de­ngan meng­gu­na­kan ka­pas ke­ring.

4. Tem­pel­kan kaca ob­yek pada te­tesan da­rah ber­i­kut­nya. Am­bil se­ba­nyak 3 te­tes da­rah.

5. Le­tak­kan kaca ob­yek di atas meja kerja. De­ngan meng­gu­na­kan ujung kaca ob­yek yang lain, se­bar­kan te­tesan da­rah hingga mem­ben­tuk ling­karan ber­di­a­me­ter

±1cm.

6. Beri la­bel pada kaca ob­yek, tunggu hingga se­di­aan ke­ring un­tuk da­pat di­war­nai.

7. Pe­war­naan se­di­aan da­rah te­bal:

a) Le­tak­kan kaca ob­yek yang te­lah di­beri se­di­aan di atas rak

b) Si­ap­kan la­rutan Gi­emsa 20% de­ngan men­cam­pur­kan 20ml la­rutan Gi­emsa stok de­ngan 80ml la­rutan bu­f­fer atau air su­ling

c) Te­tes­kan la­rutan Gi­emsa kerja di atas se­di­aan da­rah hingga se­lu­ruh da­rah ter­tu­tup zat warna. Bi­ar­kan se­lama 15 me­nit.

d) Bu­ang sisa zat warna, ke­mu­dian cuci per­la­han de­ngan air meng­a­lir. Hati-​hati se­bab se­di­aan da­rah da­pat lu­ruh aki­bat aliran air yang kuat.

e) Bi­ar­kan ke­ring de­ngan me­le­tak­kan­nya se­cara te­gak di atas ker­tas tisu atau ker­tas sa­ring.

b. Pem­bu­atan se­di­aan da­rah apus

1. Se­te­lah meng­am­bil te­tesan da­rah un­tuk pem­bu­atan se­di­aan da­rah te­bal, am­bil kem­bali 1 te­tes da­rah un­tuk pem­bu­atan se­di­aan da­rah apus. Re­mas se­di­kit ujung jari pa­sien bila da­rah su­lit ke­luar.

2. Le­tak­kan kaca ob­yek di atas meja kerja. Am­bil kaca ob­yek la­in­nya un­tuk me­nye­bar se­di­aan da­rah de­ngan cara ber­i­kut:

a) Pe­gang kaca ob­yek pe­nye­bar de­ngan ta­ngan ka­nan. Le­tak­kan sisi pen­dek kaca ob­yek pe­nye­bar di se­be­lah kiri te­tesan da­rah, po­si­si­kan hingga mem­ben­tuk su­dut 45⁰ de­ngan kaca ob­yek di ba­wah­nya.

b) Ge­ser kaca ob­yek pe­nye­bar se­cara per­la­han ke arah ka­nan hingga si­si­nya me­nyen­tuh te­tesan da­rah, dan tunggu hingga da­rah me­nye­bar di se­pan­jang sisi pen­dek ter­se­but.

c) Pe­gang kaca ob­yek per­tama de­ngan ta­ngan kiri, se­men­tara ge­ser kaca ob­yek pe­nye­bar ke arah kiri de­ngan ce­pat hingga me­nye­bar di atas kaca ob­yek per­tama.

3. Beri la­bel pada kaca ob­yek, tunggu hingga se­di­aan ke­ring un­tuk da­pat di­war­nai.

4. Pe­war­naan se­di­aan da­rah apus:

a) Le­tak­kan kaca ob­yek yang te­lah di­beri se­di­aan apus di atas rak

b) La­ku­kan fik­sasi de­ngan me­ne­tesi se­di­aan da­rah de­ngan me­ta­nol, bi­ar­kan hingga be­be­rapa de­tik atau hingga me­ta­nol ke­ring. Bu­ang sisa me­ta­nol bila ada.

c) Si­ap­kan la­rutan Gi­emsa 20% de­ngan men­cam­pur­kan 20ml la­rutan Gi­emsa stok de­ngan 80ml la­rutan bu­f­fer atau air su­ling

d) Te­tes­kan la­rutan Gi­emsa kerja di atas se­di­aan da­rah hingga se­lu­ruh da­rah ter­tu­tup zat warna. Bi­ar­kan se­lama 15 me­nit.

e) Bu­ang sisa zat warna, ke­mu­dian cuci per­la­han de­ngan air meng­a­lir. Bi­ar­kan ke­ring de­ngan me­le­tak­kan­nya se­cara te­gak di atas ker­tas tisu atau ker­tas sa­ring.

c. Ca­tatan:

1. Se­di­aan te­bal dan ti­pis da­pat di­buat ber­si­sian pada kaca ob­yek yang sama. Apa­bila ingin di­la­ku­kan se­perti ini, maka pada saat me­ne­tesi me­ta­nol pada se­di­aan apus, po­si­si­kan kaca ob­yek mi­ring ke arah se­di­aan apus se­hingga pe­ne­tesan me­ta­nol ti­dak me­nge­nai se­di­aan te­bal di ba­gian atas­nya.

2. Jari yang di­tu­suk bi­a­sa­nya jari te­ngah atau jari ma­nis ta­ngan kiri (atau ta­ngan ka­nan pada pa­sien ki­dal), dan tu­mit pada bayi.

Per­si­ap­kan jari pa­sien, la­ku­kan des­in­feksi de­ngan ka­pas al­ko­hol	Tu­suk jari de­ngan meng­gu­na­kan lan­set se­kali pa­kai	Am­bil 3 te­tes da­rah un­tuk se­di­aan da­rah te­bal  dan  1  te­te­sun­tuk se­di­aan apus
Buat se­di­aan da­rah apus de­ngan­mengge­ser­nya	Buat se­di­aan da­rah te­bal de­ngan­me­ra­ta­k­an­nya	Beri la­bel pada se­di­aan

meng­gu­na­kan si­si­pen­dek kaca ob­yek lain	meng­gu­na­kan ujung­kaca ob­yek lain

Gam­bar 174. Pem­bu­atan se­di­aan da­rah te­bal dan apus pada satu kaca ob­yek

3. La­bel da­pat di­tu­lis de­ngan pen­sil pada ba­gian pang­kal dari se­di­aan apus.

Gam­bar 175. se­di­aan da­rah te­bal dan apus pada kaca ob­yek yang sama

Re­fe­rensi

a. Di­rek­to­rat Jen­de­ral Pe­ngen­da­lian Pe­nya­kit Dan Pe­nye­hatan Ling­kungan. De­par­te­men Ke­se­hatan RI. Pe­do­man pe­na­ta­lak­sa­naan ka­sus ma­la­ria di In­do­ne­sia. Geb­rak Ma­la­ria. Ja­karta: De­par­te­men Ke­se­hatan RI, 2008.

b. Le­wis, Bain, Ba­tes. Da­cie and Le­wis Pra­cti­cal Ha­e­ma­to­logy. 10th ed. Phi­la­delp­hia: Chur­cill Li­ving­s­tone, 2006.