Lewati ke konten utama

Pe­me­rik­saan Hi­tung Jum­lah Leu­ko­sit (Ma­nual)

Me­tode: Ka­mar Hi­tung

Ba­han Pe­me­rik­saan: Da­rah EDTA atau da­rah ka­pi­ler Alat dan Re­a­gen

Alat:

  1. Ka­mar hi­tung Im­pro­ved Neu­bauer yang di­leng­kapi de­ngan kaca pe­nu­tup khu­sus ka­mar hi­tung

  2. Pi­pet se­ro­lo­gik 0,5mL un­tuk me­min­dah­kan re­a­gen

  3. Ta­bung 75 x 12 mm

  4. Pa­ra­film

  5. Pi­pet pas­teur

  6. Mik­ro­skop bi­no­ku­ler Re­a­gen**:** La­rutan Turk, kom­po­sisi:

  7. 100 mL asam ase­tat 2%

  8. 1 ml gen­tian vi­o­let 1%

Cara Pe­me­rik­saan

  1. Pi­pet­lah 0,38 ml la­rutan Turk de­ngan pi­pet ber­skala. Ma­suk­kan da­lam ta­bung re­aksi

  2. Hi­sap­lah da­rah yang akan di­per­iksa de­ngan pi­pet Sahli sam­pai te­pat pada ga­ris 20 µL

  3. Ha­pus­lah ke­le­bihan da­rah yang me­le­kat pada ba­gian luar pi­pet de­ngan ker­tas sa­ring/tis­sue se­cara ce­pat.

  4. Ma­suk­kan ujung pi­pet ter­se­but ke­da­lam wa­dah yang ber­isi la­rutan Turk. Bi­las­lah pi­pet ter­se­but de­ngan la­rutan Turk se­ba­nyak 3 kali. Ke­mu­dian wa­dah di­tu­tup de­ngan ka­ret

pe­nu­tup/ker­tas pa­ra­film dan ko­cok de­ngan membolak-​ ba­lik wa­dah mi­ni­mal 2 me­nit

  1. Am­bil ka­mar hi­tung yang ber­sih, ke­ring dan le­tak­kan de­ngan kaca pe­nu­tup ter­pa­sang men­da­tar di atas­nya

  2. De­ngan pi­pet Pas­teur te­tes­kan 3-4 te­tes la­rutan de­ngan cara me­nyen­tuh­kan ujung pi­pet pada ping­gir kaca pe­nu­tup. Bi­ar­kan ka­mar hi­tung teri­sis se­cara perlahan-​ la­han de­ngan sen­di­ri­nya

  3. Meja mik­ro­skop ha­rus da­lam po­sisi ho­ri­zon­tal. Tu­run­kan lensa atau ke­cil­kan di­a­fragma. At­rur­lah fo­kus ter­le­bih da­hulu de­ngan me­ma­kai lensa ob­jek­tif 10x sam­pai ga­ris bagi da­lam bi­dang be­sar tam­pak je­las.

  4. Hi­tung se­mua leu­ko­sit yang ter­da­pat da­lam 4 bi­dang be­sar pada sudut-​sudut se­lu­ruh per­mu­kaan (1,3,7 dan 9)

  5. Mu­lai­lah meng­hi­tung dari su­dut kiri atas te­rus ke ka­nan, ke­mu­dian tu­run ke ba­wah dari ka­nan ke kiri, lalu tu­run lagi ke ba­wah dan mu­lai lagi dari kiri ke ka­nan dan se­te­rus­nya. Cara se­perti ini ber­laku un­tuk ke­em­pat bi­dang be­sar.

  6. Sel-​sel yang le­tak­nya me­nying­gung ga­ris ba­tas se­be­lah atas dan kiri ha­rus di­hi­tung. Se­ba­lik­nya sel-​sel yang me­nying­gung ga­ris ba­tas se­be­lah ba­wah dan ka­nan ti­dak di­hi­tung.

Per­hi­tungan:

Peng­en­ceran da­rah da­lam pi­pet = 20x, se­dang­kan luas tiap bi­dang be­sar = 1mm2 dan tinggi ka­mar hi­tung = 1mm.

Leu­ko­sit di­hi­tung da­lam 4 bi­dang be­sar se­hingga vo­lume sel yang di­hi­tung 0,4 mm3 (0,4 µL)

Peng­en­ceran yang di­la­ku­kan ada­lah 20 kali. Bila jum­lah sel yang di­hi­tung N maka:

Fak­tor per­hi­tungan 20 = 50

5 x 1 x 0,1

Jum­lah leu­ko­sit per µL da­rah = jum­lah leu­ko­sit yang di­hi­tung da­lam 4 bi­dang x 50

Pe­la­poran Ha­sil Pe­me­rik­saan Jum­lah leu­ko­sit =................................................ / µL